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細(xì)胞培養(yǎng)

細(xì)胞培養(yǎng)

  • 價格¥2000
  • 單位
  • 貨號HKF6001
  • 品牌浩克

產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品參數(shù)
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服務(wù)介紹:

貨號名稱規(guī)格價格
HKF6001細(xì)胞培養(yǎng)2000元
 簡介:
  細(xì)胞培養(yǎng)是采用無菌操作的方法,模擬動物體內(nèi)的生理條件,在體外進(jìn)行培養(yǎng).使其不斷地生長、繁殖,從而觀察細(xì)胞的增殖、分化以及細(xì)胞衰老等過程的生命現(xiàn)象。常見的細(xì)胞培養(yǎng)方式可分為貼壁和懸浮兩種。細(xì)胞培養(yǎng)的常規(guī)操作包括:
1)細(xì)胞的接種和傳代
2)細(xì)胞計數(shù)
3)細(xì)胞的復(fù)蘇和凍存。
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
  1、完全培養(yǎng)基配置:培養(yǎng)基的配制(需在超凈臺內(nèi)無菌操作):10%FBS+90%培養(yǎng)基(根據(jù)細(xì)胞的種類分為DMEM/F12、DMEM/HIGH、
MEM/EBSS、改良型RPMI-1640培養(yǎng)基)。
  2、細(xì)胞復(fù)蘇:
a. 把凍存管從液氮中取出來,立即投入37℃水浴鍋中,輕微搖動。液體都融化后(大概1-1.5分鐘),拿出來噴點(diǎn)酒精放到超凈工作臺里。
b.把上述細(xì)胞懸液吸到裝10ml培養(yǎng)基15ml的離心管中(用培養(yǎng)基把凍存管洗一遍,把粘在壁上的細(xì)胞都洗下來),1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
c.把上清液倒掉,加1ml培養(yǎng)基把細(xì)胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中前后左右輕輕搖動,使培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞均勻分布。
d.標(biāo)好細(xì)胞種類和日期等,放到CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),細(xì)胞貼壁后換培養(yǎng)基。
e. 3天換一次培養(yǎng)基。
  3、細(xì)胞傳代:
a. 培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞覆蓋率達(dá)到80%-90%時要傳代。
b.把原有培養(yǎng)基吸掉。
c.加適當(dāng)?shù)囊鹊鞍酌?能覆蓋細(xì)胞就行),消化1-2分鐘。
d.細(xì)胞都變圓后吸出胰酶 終止消化。
e.加入20ml的完全培養(yǎng)基,移液槍吹打細(xì)胞,把細(xì)胞都懸浮起來。
f.根據(jù)細(xì)胞種類把細(xì)胞傳到幾個培養(yǎng)瓶中。一般,癌細(xì)胞分4個,正常細(xì)胞傳3個。繼續(xù)培養(yǎng)。
  4、細(xì)胞凍存:
把細(xì)胞消化下來并離心(同上)。用配好的凍存液把細(xì)胞懸浮起來,分裝到滅菌的凍存管中,靜止幾分鐘,寫明細(xì)胞種類,凍存日期。
4℃30min,-20℃30min,-80℃過夜,然后放到液氮罐中保存。
凍存液的配制:70%的完全培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加,邊滴邊搖。

樣本寄送須知:

  1.活細(xì)胞:一定要不透氣方瓶寄,常溫;

  2.凍存細(xì)胞:純干冰件,保證干冰充足

暫無

說明文檔下載

 常用的細(xì)胞培養(yǎng)基:

名稱成份適用細(xì)胞類型備注
MEMBSS+12種氨基酸+谷氨酰胺+8種維生素各種傳代細(xì)胞系和原代細(xì)胞在此基礎(chǔ)上改良的培養(yǎng)基有BEM、DMEM
DMEM改良自MME,各成分量加倍貼附型腫瘤細(xì)胞,CHO細(xì)胞分低糖(5.5mM)、高糖(25mM)型,高糖型較常用
RPMI-1640BSS+21種氨基酸+維生素11種等懸浮細(xì)胞,正常細(xì)胞,腫瘤細(xì)胞最初針對淋巴細(xì)胞設(shè)計
L15半乳糖替代了葡萄糖;磷酸鹽緩沖體系快速增殖瘤細(xì)胞,CO2缺乏以半乳糖代替了葡萄糖
McCoy5ABSS+40種成分原代細(xì)胞,淋巴細(xì)胞,組織活檢細(xì)胞最初為肉瘤細(xì)胞設(shè)計
DMEM/F12高濃度與成分多樣化原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系F12與DMEM等體積混合,可作為開發(fā)無血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方
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