| 產(chǎn)品目錄 | 主要成分 | 產(chǎn)品規(guī)格 |
| 反應(yīng)緩沖液 | 酒石酸鉀鈉 | 20ml |
| 副品紅溶液 | 副品紅 | 1ml |
| 亞硝酸鈉溶液 | 亞硝酸鈉 | 1ml |
| AS-BI 磷酸鹽底物溶液 | 萘酚 AS-BI 磷酸鹽 | 1ml |
【主要用途】
抗酒石酸酸性磷酸酶染色,又稱 Trap 染色，是用于檢測骨、骨細(xì)胞中破骨細(xì)胞的染色， 使破骨細(xì)胞呈紅色，細(xì)胞核淺藍(lán)色，用以顯示破骨細(xì)胞的分布及數(shù)量變化。
【產(chǎn)品簡介】
抗酒石酸酸性磷酸酶 (tartrate resistant acid phosphatase，TRAP) 是破骨細(xì)胞 的標(biāo)志性酶，特異性分布于破骨細(xì)胞中。TRAP 染色試劑盒即是用于顯示組織中的破骨細(xì)胞。 其中基本原理在于，在含酒石酸的酸性條件下，抗酒石酸酸性磷酸酶 TRAP 能將萘酚 AS-BI 磷酸鹽水解，產(chǎn)生的萘酚 AS-BI 與六偶氮副品紅結(jié)合，形成非水溶性的酒紅色物質(zhì)沉積在 酶活性原位，從而實現(xiàn)對抗酒石酸酸性磷酸酶的顯色和定位。
本產(chǎn)品基本組成成分：反應(yīng)緩沖液；副品紅溶液；亞硝酸鈉溶液；AS-BI 磷酸鹽底物 溶液。經(jīng)本產(chǎn)品染色后，破骨細(xì)胞中的TRAP 呈酒紅色，定位于細(xì)胞漿。按照切片上每個 組織點 300 μL 用量，本試劑盒可以做 50 次以上 TRAP 染色。【儲存與運輸】
本產(chǎn)品冰袋運輸；4℃避光保存，其中 AS-BI 磷酸鹽底物溶液-20℃保存，有效期 12 個月。
【使用方法】
配制 TRAP 工作液：
(1) 取 50 μL 副品紅溶液與 50 μL 亞硝酸鈉溶液在潔凈離心管中混勻，得到六偶氮副 品紅溶液；
(2) 向第 1 步的 100μL 六偶氮副品紅溶液中加入 100 μLAS-BI 磷酸鹽底物溶液，吹吸數(shù) 次充分；
(3) 吸取 1.8 mL 反應(yīng)緩沖液加入到第 2 步的混合液中充分混勻；
(4) 第 3 步的混合液經(jīng)針式濾器過濾 (0.45μm 水系濾膜) 即得到 TRAP 工作液。
注意：務(wù)必按照所屬順序配制工作液。每個組織點大約需要 200-300μL 工作液，根據(jù)使 用量配制，現(xiàn)配現(xiàn)用，避免浪費。
石蠟切片操作步驟 (供參考)
1.石蠟切片脫蠟至水，純水洗數(shù)分鐘。
2.將切片用組化筆化圈后放在 (加有一定量的防止切片蒸干的純水) 濕盒中，用純水37℃ 孵育 2h。
3.切片孵育完成后傾去純水，滴加過濾好的 TRAP 工作液覆蓋組織，置于 37℃避光反應(yīng) 20-30 min。
4. (可選， 自備相關(guān)試劑) 復(fù)染細(xì)胞核：傾去孵育液并水洗，以蘇木素染液進(jìn)行染核。
5.脫水，透明。
6.中性樹膠封片。
【注意事項】
1、工作液配制過程中需充分溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用。
2、染液應(yīng)保存在4℃，使用前先常溫復(fù)溫。
杭州浩克生物
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